目前对于基因序列的突变分析国内外多采用直接测序方法,直观又准确。例如,1996年Sakai等报道了对高α脂蛋白血症患者CETP基因内含子10和内含子14片段序列的突变分析。其方法为:采取患者全血根据Kunkel等方法准备基因DNA;CETP基因内含子10的splice donor位点的PCR扩增引物为:5'-CCCTGCGAATTCTTCTTCTGAGGAG...
...脂类(甘油三酯、胆固醇酯、磷脂酰胆碱)转运。脂质转运蛋白也能促进膜间脂质分子交换或促进从一种膜向另一种膜净转运脂质分子,虽然有例外,但在体外分析表明脂质转运蛋白一般是促进膜间脂质分子交换。当供体和受体膜间TG浓度相等时,MTP能促进膜间交换TG,而且当供体和受体膜间中性脂类浓度不平衡,中性脂类仍可转移到受体颗粒,表明MTP能净转运TG和CE。MTP存在于肝细...
目前对于基因序列的突变分析国内外多采用直接测序方法,直观又准确。例如,1996年Sakai等报道了对高α脂蛋白血症患者CETP基因内含子10和内含子14片段序列的突变分析。其方法为:采取患者全血根据Kunkel等方法准备基因DNA;CETP基因内含子10的splice donor位点的PCR扩增引物为:5'-CCCTGCGAATTCTTCTTCTGAGGAG...
Felgines等在研究RICO鼠的肝载脂蛋白时报道了抗体法的应用。 用来源于 牛肾 皮质的LDL-R免疫兔,得到兔抗牛-LDL-R抗体,离心法收集纯化细胞膜蛋白,点样于硝化纤维膜上,于猝灭液中温育1h,以TTBS洗3次,加入稀释的抗LDL-R抗体血清,再温育90min,TTBS洗后,纤维膜用结合有 辣根 过氧化物酶的第二抗体羊抗兔-IgG温育1h30min...
Felgines等在研究RICO鼠的肝载脂蛋白时报道了抗体法的应用。 用来源于 牛肾 皮质的LDL-R免疫兔,得到兔抗牛-LDL-R抗体,离心法收集纯化细胞膜蛋白,点样于硝化纤维膜上,于猝灭液中温育1h,以TTBS洗3次,加入稀释的抗LDL-R抗体血清,再温育90min,TTBS洗后,纤维膜用结合有 辣根 过氧化物酶的第二抗体羊抗兔-IgG温育1h30min...
Felgines等在研究RICO鼠的肝载脂蛋白时报道了抗体法的应用。 用来源于 牛肾 皮质的LDL-R免疫兔,得到兔抗牛-LDL-R抗体,离心法收集纯化细胞膜蛋白,点样于硝化纤维膜上,于猝灭液中温育1h,以TTBS洗3次,加入稀释的抗LDL-R抗体血清,再温育90min,TTBS洗后,纤维膜用结合有 辣根 过氧化物酶的第二抗体羊抗兔-IgG温育1h30min...
人LDL受体基因长度45kD,由18个外显子和17个内含子组成共长达2535bp。LDL受体基因如图6-2所示。 外显子1编码短的5'侧序列及信号肽。内含子1在信号肽远端2个氨基酸处中断编码序列。配体结合域中的7个由40个氨基酸残基组成的重复序列中,第Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ残基序列均由各自的外显子编码,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ则由同一个外显子编码。 EGF前体结构域由外显子7...
LDL受体相关蛋白质(LDL receptor related protein ,LRP)是Herz等于1988年发现,其组成及结构与LDL受体类同,可能属于残粒受体(remnant receptor)的一种。其后证明,LRP又是α2-巨球蛋白(α2-macroglobulin,α2MG)受体。根据LRP的cDNA分析,他含有与LDL受体相同重复序列,而且与...
对ApoB基因多态性进行检测、分析的方法很多,如:限制性内切酶的酶谱分析法,PCR直接分析法,PCR产物RFLP分析法,等位基因特异性寡核苷酸(ASO)杂交法等等,其中最多用且简单的方法有PCR产物直接分析法和PCR产物RFLP分析法。 PCR产物直接分析法,是采用合适的引物,通过多次扩增,获得靶基因序列扩增片段,直接分析法片段的大小,可用于分析基因的缺失与...
LDL受体相关蛋白质(LDL receptor related protein ,LRP)是Herz等于1988年发现,其组成及结构与LDL受体类同,可能属于残粒受体(remnant receptor)的一种。其后证明,LRP又是α 2 -巨球蛋白(α 2 -macroglobulin,α 2 MG)受体。根据LRP的cDNA分析,他含有与LDL受体相同重复...
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