近20年来分子克隆技术的发展突飞猛进，重组DNA操作技术包括的范围不断扩大，DNA克隆的方法亦多种多样，特别是PCR技术的应用，以及RFLP、SSCP等技术的开展，使得DNA克隆技术的应用日益广泛。 DNA克隆技术在 动脉粥样硬化 等疾病的病因及诊疗研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因发生的特异突变时，可以设计合成扩增引物，进行模板DNA的PCR扩...
Apo（a）表型检测方法主要有两大类，一类应用SDS-PAGE分离载脂蛋白，然后结合免疫印迹技术检测不同Apo（a）表型；另一类方法的不同之处在于用SDS-agarose（琼脂糖）电泳代替SDS-PAGE分离载脂蛋白，使检测分辨率大为提高。 Utermann等（1987）应用-SDS垂直板PAGE结合免疫印技术，检出6种Apo（a）异构体，共14种临床表型。...
在duke大学和北卡罗来那州大学(unc)医学院研究人员的合作攻关下，终于发现了一种一直没有被认识到引起的原因，胰腺炎常常与酗酒和滥用药物有关，有些还是病因未明的特发性胰腺炎。发现的这个原因和解剖结构的异常以及外界物质无关，相反，却和引起 囊性纤维化 的基因突变有关.unc医学副教授dr.peadarg.noone说，如果2个和囊性纤维化相关的基因都发生突变...
一、载脂蛋白测定方法 1．单向免疫扩散法（radialimmunodiffusion,RID） 该法较简单，一般实验室均可进行。消耗较多的抗血清，扩散过程至少24h，最多需72h，测定下限值为10μg/ml。该方法虽然简单，应严格控制有关条件如：含抗血清的琼脂糖凝胶厚度要均匀；加入小孔的稀释抗原（血清）量要准确；含ApoB的脂蛋白如VLDL和LDL颗粒大小不...
...质 性质是由 DNA 分子 上 碱基 数量和顺序决定的。如果DNA分子的碱基数量或顺序发生变化，由它编码的蛋白质结构就发生相应的改变。由于 基因突变 导致蛋白质分子质和量异常，从而引起机体 功能障碍 的一类 疾病 称为 分子病 （molecular disease）。 分子病种类很多,根据各种蛋白质的功能可将分子病分为运输性 蛋白 病、 凝血 及抗凝血因子缺...
...内的漂浮行为，用超速离心技术可把血浆脂蛋白分成四大族： 乳糜微粒（chylomicron, CM）：d<0.95g/ml 极低密度脂蛋白（VLDL）：d=0.95～1.006g/ml 低密度脂蛋白（LDL）：d=1.006～1.063g/ml 高密度脂蛋白（HDL）：d=1.063～1.21g/ml 现在用密度梯度分级分离、亲和层析、电泳等技术与浮选技术联合...
...ffusion,RID） 该法较简单，一般实验室均可进行。消耗较多的抗血清，扩散过程至少24h，最多需72h，测定下限值为10μg/ml。该方法虽然简单，应严格控制有关条件如：含抗血清的琼脂糖凝胶厚度要均匀；加入小孔的稀释抗原（血清）量要准确；含ApoB的脂蛋白如VLDL和LDL颗粒大小不一，如琼脂糖凝胶浓度在1.5%～2.0%,可能仅测出LDL的ApoB，...
1． 高脂血症 众所周知，高脂血症（hyperlipemia）是 动脉粥样硬化 的重要危险因素。高脂血症实际上也可认为是 高脂蛋白血症 ，一般以成人空腹12～14小时血甘油三酯超过160mg/dl（1.81mmol/L），胆固醇超过260mg/dl（6.76mmol/L）为高脂血症。大量 流行病学 调查证明，血浆低密度脂蛋白（LDL）、极低密度脂蛋白（VLD...
以质粒或噬菌体作载体进行DNA克隆，在理论上是很简捷的，即用一种限制酶切割质粒DNA，然后在体外与外源，DNA（如干扰素基因，生长激素基因）相连接，再用所得到的重组质粒转化细菌如大肠杆菌，以鉴定重组DNA。 通常所用的质粒载体有pBR322、pUC18、pUC19等，噬菌载体有M13噬菌体载体等。 图24-1 质粒载体的定向克隆 一、质粒或噬菌体载体与外源D...
载脂蛋白CⅢ基因位于11号染色体与载脂蛋白AⅠ-AⅣ形成一基因族，它位于载脂蛋白AⅠ下游，有三个内含子和四个外显子。目前对载脂蛋白CⅢ基因3'末端非编码区C-G对换产生一个Sac-Ⅰ酶切位点与 冠心病 的关系未有定论。用多聚酶链反应（PCR）扩增载脂蛋白CⅢ基因3'末端233bp，再用Sac-1酶切扩增产物，可以检测载脂蛋白CⅢ基因3'末端的突变及其与 动脉...
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