虽然转基因动物(尤其是TGm)这一生命科学研究的新体系引入到心血管疾病研究领域只有短短十年时间,但已取得了惊人的成果。转基因动物模型在脂代谢障碍与AS病因和发病机理中的研究应用仍然方兴未艾。例如:运用日益成熟的各种转基因技术建立更多的与脂代谢相关的TGM系动物模型;由仅研究含一种与脂代谢紊乱有关的基因的TGM转向研究含有几种基因的TGM研究;运用基因打靶与基...
...ffusion,RID) 该法较简单,一般实验室均可进行。消耗较多的抗血清,扩散过程至少24h,最多需72h,测定下限值为10μg/ml。该方法虽然简单,应严格控制有关条件如:含抗血清的琼脂糖凝胶厚度要均匀;加入小孔的稀释抗原(血清)量要准确;含ApoB的脂蛋白如VLDL和LDL颗粒大小不一,如琼脂糖凝胶浓度在1.5%~2.0%,可能仅测出LDL的ApoB,...
一、血管壁细胞提取 1.以无菌术取动脉,立即放入4℃、5%水解乳蛋白Hanks液中漂洗,除去凝血。 2.用小镊剔除外膜纤维、脂肪组织,用剪子沿血管壁纵向剪开血管,用Hanks液洗2次。 3.可先分开内皮细胞和平滑肌细胞,也可不区分两类细胞,将血管切成小块,放入2%胶原酶,温浴12~18h。 4.梯度液选择40%~70%,40%梯度液应是4份precoll、1...
蛋白质性质是由DNA分子上碱基数量和顺序决定的。如果DNA分子的碱基数量或顺序发生变化,由它编码的蛋白质结构就发生相应的改变。由于基因突变导致蛋白质分子质和量异常,从而引起机体功能障碍的一类疾病称为分子病(molecular disease)。 分子病种类很多,根据各种蛋白质的功能可将分子病分为运输性蛋白病、凝血及抗凝血因子缺乏症、免疫蛋白缺陷病、膜蛋白病、...
以质粒或噬菌体作载体进行DNA克隆,在理论上是很简捷的,即用一种限制酶切割质粒DNA,然后在体外与外源,DNA(如干扰素基因,生长激素基因)相连接,再用所得到的重组质粒转化细菌如大肠杆菌,以鉴定重组DNA。 通常所用的质粒载体有pBR322、pUC18、pUC19等,噬菌载体有M13噬菌体载体等。 图24-1 质粒载体的定向克隆
一、血管平滑肌细胞的培养 血管平滑肌细胞培养常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。贴块法具有获得平滑肌细胞纯度高,量多,操作简便的优点。但用贴块法易使平滑肌细胞胞质内肌丝丧失,亚细胞器增加。相反,酶解离法,由于酶的作用使细胞间失去连接,细胞内肌丝含量丰富,保持收缩型状态。培养平滑肌细胞常取材于兔、猪、鼠、猴的胸腹主...
...osis:A edfense mechanismgone away.Am j Pathol.1993,143:987 5.秦树有。细胞因子与动脉样 硬化 ,国外医学老年医学分册,1994,15:193 6.马礼坤,病毒感染与 动脉粥样硬化 ,国外医学生理,病理科学与临床分册,1995,15:61 7.柯永胜,癌基因与动脉粥样硬化,国外医学老年医学分册,199...
动脉粥样硬化 (atherosclerosis,AS)是指动脉内膜的脂质、血液成分的沉积,平滑肌细胞及胶原纤维增生,伴有坏死及 钙化 等不同程度病变的一类慢性进行性病理过程。AS包括粥瘤(atheroma)和 硬化 (sclerosis)两层涵义,前者指脂质沉积坏死所形成的粥样 病灶 ,后者指胶原纤维增生,AS是心脑血管系统中最常见的疾病之一,严重危害 人类...
...在机体生长、发育、代谢发挥着不可取代的作用。由脂肪酸转化的前列腺素,而前列腺素近年来倍受重视,它对心血管系统的作用表现为增加心肌收缩性,降低动脉血压,同时伴随着血管扩张和增加血管通透性,前列腺素对大脑皮层有镇定和安定效应。前列腺素还能使 支气管哮喘 缓解而被用于治疗 哮喘 。另外,鞘磷脂、糖鞘酯是神经组织特有的物质,其作用不可忽视。还有一些维生素,如类萜维生...
一、血管内皮细胞 动脉血管内皮细胞多为长椭圆多角形,呈镶嵌排列,细胞长轴与血流方向平行,胞核圆形,表面有小孔和小窗。在内皮表面有50~1000A呈茸毛状的多糖,这些多糖与细胞的通透性有关。细胞浆中有肌球蛋白和肌动蛋白能够收缩,细胞间有紧密连接和裂隙连接两种连接形式。内皮基质与基底膜相连,前者厚600~700A,含有糖蛋白、胶原、弹性蛋白,它可作为基底膜的一个...
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