目前对于基因序列的突变分析国内外多采用直接测序方法，直观又准确。例如，1996年Sakai等报道了对高α脂蛋白血症患者CETP基因内含子10和内含子14片段序列的突变分析。其方法为：采取患者全血根据Kunkel等方法准备基因DNA；CETP基因内含子10的splice donor位点的PCR扩增引物为：5'-CCCTGCGAATTCTTCTTCTGAGGAG...
高载脂蛋白β脂蛋白血症（hyperapo beta lipoproteinemia ,HyperApoB）属遗传性脂代谢紊乱性疾病，以小而致密的低密度脂蛋白（LDL）微粒升高为主要特征，后者是 冠心病 的重要危险因素之一。HyperAopB的代谢缺陷为：①肝组织大量合成VLDL，致使小而致密的LDL水平升高；②餐后TG水解延迟，大量游离脂肪酸堆积在血液中。到...
脂类代谢过程中的非极性CE和TG以及载脂蛋白，在脂蛋白之间进行转运和交换。这种交换转运是否需要载体，如何转运，各脂蛋白之间的脂质和蛋白又如何达到平衡，早在60年代，人们已开始了饶有兴趣的研究。1968年Akenumz与Glomset等发现血浆中有LCAT能催化HDL上Ch变成CE，转运到CM及VLDL或其他脂蛋白上，并很快达到平衡。其后陆续有多种参与脂蛋白代...
随着分子生物学的发展和脂代谢相关蛋白基因的克隆，序列测定及表达调控组件研究的深入，为探讨载脂蛋 白及 其他脂代谢相关蛋白和AS的关系，以期建立As TGM模型奠定了基础。现已对ApoAⅠ、AⅡ、AⅣ、B、CⅠ、CⅢ、E和Apo（a），以及LDL-R、CETP、LRP及LPL等进行了转基因动物研究，先后建立了各种TGM模型。为深入了解脂蛋白运输基因如何调控以及...
ApoE在胆固醇与甘油三酯代谢中起着重要作用。在正常人群中，10%以上的个体间血浆胆固醇水平的着异可归究于ApoE基因的多态性。主要的ApoE等位基因有ApoE2、ApoE3和ApoE4。ApoE3在人群中的出现率最高，被认为较常见的ApoE基因。ApoE2与Ⅲ型 高脂蛋白血症 相关，而ApoE4在老年性 痴呆 病（Alzheimer's disease）患...
ApoB基因多态性研究较多的有RFLP、VNTR、SP多态性，分别叙述如下： 1．RFLP的检测 ApoB有10种RFLP，一般采用PCR-RPLPs方法进行分析，研究较多的有第26外显子XbaⅠ、MspⅠ位点，第29外显子EcoRⅠ位点，在Apob DNA上的位置如图19-6，图19-7所示： 图19-6 ApoB基因部分RFLP S 示意图 图19-6 ...
蛋白多糖具有可溶于4mol/L盐酸胍的性质，再经DEAE-纤维素层析除去其他杂质，非蛋白多糖与蛋白多糖用不同浓度尿素可分段层析分开。 1．取动脉血管小心除去血管周围脂肪组织和纤维膜，用冷0.5mol/l PBS pH7.8洗涤，2kr/min离心10min。 2．用匀浆器破碎，加入15倍体积的提取液（0.05mol/L乙酸pH5.8、4.0mol/L盐酸胍、...
提取粘连蛋白的基本原理是用NaCl脱氧胆酸钠液提取血管壁中的粘连蛋白，再用高盐除去杂质，然后进一步用Sephacryl层析纯化，方法如下： 1．将动脉血管壁组织加10倍体积处理液（0.05mol/lTris-HCL pH7.6、0.5%核酸酶），4℃搅拌20min，10kr/min离心10min。 2．沉淀用含0.05mol/L Tris-HCl pH7.6...
提取方法较多，各有优缺点。1969年Bornstein和Ross先用5mol/L盐酸胍抽提，再用胶原酶水解其他非弹性蛋白组分，最后还原二硫键，分离提取弹性蛋白。具体方法如下： 1．将动脉血管壁洗净，小心除去附着结缔组织。 2．将血管壁组织浸于4℃ 50%的吡啶液，破碎组织，3kr/min离心15min。 3．取沉淀用蒸馏水洗涤3次，真空干燥后研成粉末。 4．...
蛋白质溶液浓度测定方法有多种，下述几种方法可供选用。蛋白质浓度的测定，往往用于计算纯化方法的回收率的重要方法。 一、双缩脲法 双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法，至令仍广泛采用。在需要快速，但不很准确的测定中，常用此法。硫铵不干扰显色，这对蛋白质提纯的早期价段是非常有利的。双缩脲法的原理是Cu 2+ 与蛋白质的肽键，以及酪氨酸残基络合，形成 紫蓝 ...
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