免疫化学方法是利用抗原与其相应抗体具有特异结合的特性，用荧光素、酶、发光素、同位素、胶体金标记某种抗原的抗体，借助荧光显微镜、电镜、图像分析仪、同位素监测仪、分光亮度仪便可对组织中的抗原进行定性或定量，可用于胶原、蛋白多糖、弹性蛋白、粘连蛋白、血浆成分的定位和定量分析。 1．抗原提取及单克隆抗体的制备（从略）。 2．抗体的标记：基本原理是将抗体与标记物以共价...
以质粒或噬菌体作载体进行DNA克隆，在理论上是很简捷的，即用一种限制酶切割质粒DNA，然后在体外与外源，DNA（如干扰素基因，生长激素基因）相连接，再用所得到的重组质粒转化细菌如大肠杆菌，以鉴定重组DNA。 通常所用的质粒载体有pBR322、pUC18、pUC19等，噬菌载体有M13噬菌体载体等。 图24-1 质粒载体的定向克隆
...含的载脂蛋白密切相关，因此我们用表2-2列出几种主要的脂蛋白的化学组成。 表2-2 人血 浆脂蛋白的化学组成 总脂蛋白的重量百分比 CM VLDL LDL HDL 2 HDL 3 蛋白质 2.0 10 21 41 55 磷 脂 7.5 18 22 29.5 22.5 胆固醇酯 7.7 12 35 16.2 11.7 游离胆固醇 0.8 7 8 5.4 2.9...
虽然转基因动物（尤其是TGm）这一生命科学研究的新体系引入到心血管疾病研究领域只有短短十年时间，但已取得了惊人的成果。转基因动物模型在脂代谢障碍与AS病因和发病机理中的研究应用仍然方兴未艾。例如：运用日益成熟的各种转基因技术建立更多的与脂代谢相关的TGM系动物模型；由仅研究含一种与脂代谢紊乱有关的基因的TGM转向研究含有几种基因的TGM研究；运用基因打靶与基...
...考虑用马作为免疫动物。因动物个体差异的关系，即使是用一种抗原去免疫多个白兔，所得抗血清特异性会有很大的差别。因此，为了得到比较一致的抗血清，常用能产生大量抗血清的羊或马为免疫动物。 佐剂：佐剂是指与抗原混合注入机体后，能增加抗原的免疫性或者能改变免疫反应类型的一种物质。人们公认的佐剂是福氏佐剂（Freund’adguvant），具有明显的免疫剌激作用。福氏佐...
动脉粥样硬化 是 动脉硬化 中最常见而重要的类型，其特点是受累 动脉 的内膜有类脂质的沉着，复合糖类的积聚，继而 纤维 组织 增生 和钙沉着，并有动脉中层的病变。本病主要累及大型及中型的肌弹力型动脉，以 主动脉 、 冠状动脉 及 脑动脉 为多见，常导致管腔闭塞或管壁破裂 出血 等严重后果。 动脉粥样硬化多见于40岁以上的男性和绝经期后的女性。本病常伴有 高血...
ApoE生理功能有：①是LDL受体的配体，也是肝细胞CM残粒受体的配体，它与脂蛋白代谢有密切相关性；②ApoE具有多态性，多态性是决定个体血脂水平与 动脉粥样硬化 发生发展密切相关；③参与激活水解脂肪的酶类，参与免疫调节及神经组织的再生。 人类 ApoE主要在肝脏和脑组织合成，在其他组织包括单核细胞（含巨噬细胞）也有合成能力。人的肾上腺、卵巢颗粒细胞也能合成...
蛋白质溶液浓度测定方法有多种，下述几种方法可供选用。蛋白质浓度的测定，往往用于计算纯化方法的回收率的重要方法。 一、双缩脲法 双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法，至令仍广泛采用。在需要快速，但不很准确的测定中，常用此法。硫铵不干扰显色，这对蛋白质提纯的早期价段是非常有利的。双缩脲法的原理是Cu2+与蛋白质的肽键，以及酪氨酸残基络合，形成 紫蓝 色络...
... 样排列，如前所述；②电子显微镜下可发现Weibel-Palade小体；③存在第Ⅷ因子关连抗原（VWF），用免疫法测定为阳性反应。此外，在 硬化 血管取材时，巨噬细胞转化的泡沫细胞可能混入，除形态学的差异外，泡沫细胞含有丰富的氧化修饰的LDL，氧化LDL与相应抗体反应后在荧光显微镜下极易区别。 二、平滑肌细胞的鉴定 如前所述，平滑肌细胞除形态、排列有其自身特...
动脉血管壁胶原提取的基本方法是，首先除去凝血等其他杂质，由于胶原为杆状三螺旋结构，能耐受胃蛋白酶的作用，但是两端球蛋白结构能被胃蛋白酶水解。胶原纤维内分子间的共价交联是由分子末端赖氨酸或羟赖氨酸形成，用胃蛋白酶切断末端交联结构，使胶原分子的巨形结构被破坏，从完整分子可提出各种类型的胶原。 （一）胶原的初步分离 1．小心取出动脉血管，用0.05mol/L BP...
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