...干燥,0℃贮存待用。 三、载脂蛋白的分离纯化法 (一)凝胶过滤法 凝胶过滤(gel filtration)技术是60年代兴起的一种简便有效的生物分离纯化方法。当混合溶液通过凝胶过滤层析柱时,因凝胶具有网状结构,小分子物质能进入其内部,而大分子物质却被排阻于外部,在过滤的过程中,溶液中的物质按不同分子量筛选分开,达到分离纯化的目的。这一技术又称为分子筛层析,或...
....21g/ml组份中精制得到,是由467个氨基酸残基组成的单链多肽,其中非极性氨基酸残基高达45%,是一种疏水性蛋白质,很容易被氧化而失活。CETP由肝脏、小肠、肾上腺、脾脏、脂肪组织及巨噬细胞合成,细胞内成熟蛋白分子量为74000。最近已阐明其结构编码基因存在于第16染色体。与LCAT的基因靠近。CETP基因由16个外显子和15个内含子约20.5kb组成。
脂类在血液中以脂蛋白形式进行运送。并可与细胞膜上存在的特异受体相结合,摄取进入细胞内进行代谢。迄今为止,报道的受体已有很多种,研究最详细的是LDL受体,其次是清道夫受体,再就是VLDL受体,这三种受体的氨基酸序列。构象及与配体的结合部位都已阐明,并且已成功地得到cDNA。Brown和Goldstein于1974年研究 家族性高胆固醇血症 (familial ...
生物体内具有防御自由基毒害的抗氧化剂或抗氧化酶。
...等于1968年首先从人HDL中分离纯化得到ApoAⅠ。70年代中期Brewer阐明了ApoAⅠ的氨基酸序列,并预测了其二级结构的要点。在分子生物学兴起的80年代,Karathanasis等人相继报道了人ApoAⅠcDNA和染色体DNA序列。人成熟的ApoAⅠ的由243氨基酸残基组成,是单一多肽链,分子量为28300D。人及大鼠、猴、兔、牛、鸭、树鼷等动物的A...
...NA克隆的方法亦多种多样,特别是PCR技术的应用,以及RFLP、SSCP等技术的开展,使得DNA克隆技术的应用日益广泛。 DNA克隆技术在 动脉粥样硬化 等疾病的病因及诊疗研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因发生的特异突变时,可以设计合成扩增引物,进行模板DNA的PCR扩增,所得的PCR产物较小,仅有300多bp,且纯度不足以进测序。为了对此突变序...
脂蛋白是血液中脂质的运输形式,与细胞膜受体结合被摄入胞内进行代谢。
血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。 目前,对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程,均必须检测血浆(清)中的脂类,通过其含量的变化,对临床疾患提供协助诊断的依据。有关医学科研工作,脂类的定量检测也是一项必备的研究项目。 1.胆固醇测定 血浆中胆固醇及其酯的含量检测,从方法学上可分为两大类:一类是化学法包括抽提法和直接测定法,这类方法...
...种G型螺旋。与脂类或不同的脂质微粒或二甲基磷脂酰胆碱结合的结果说明,G螺旋和第二螺旋的末端在脂质连结,在ApoE的四聚体化过程中起重要的作用。更精确地说是263~286片段可能在脂连结ApoE与VLDL的结合中起有关键作用。ApoE主要由肝脏合成,近年来发现脑,肾,骨骼,肾上腺及巨噬细胞也能合成。ApoE其结构如图3-2所示。 图3-2 载脂蛋白E结构示意图
...等发现 兔血 浆无脂蛋白部分含有使胆固醇酯转运的特殊蛋白质。Barter等报道兔血浆d>1.21g/ml部分存在有促进脂蛋白和TG交换的蛋白因子,其后从高胆固醇血症兔血浆中分离得到这种活性蛋白,能促使HDL与LDL和VLDL之间进行CE交换,以后的研究中又发现这种质白质与 动脉粥样硬化 发生密切相关,这种特殊蛋白被之谓胆固醇酯转移蛋白(cholester e...
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