荧光血管造影，早期病变区毛细血管均有荧光渗漏、荧光充盈迟缓，静脉轻度扩张，管壁染色。晚期可见大面积视网膜血管完全阻塞，微 动脉瘤 和局部扩张的血管，二者均有荧光素渗漏。
1．检查抗原法 这是最早的方法，用已知特异性抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应抗原结合，在荧光显微镜下即可见抗原存在部位呈现特异性荧光。此法很特异和简便，但一种荧光抗体只能检查一种抗原，敏感性较差（图3-2）。 图3-2 直接法 2．检查抗体法 将抗原标记上荧光素，即为荧光抗原，用此荧光抗原与细胞或组织内相应抗体反应，而将抗体定位检...
为了保证免疫荧光细胞化学染色的准确性，排除某些非特异性染色，必须在初次试验时进行以上对照试验： 1．直接法 需设下述对照试验 （1）标本自发荧光对照：标本只加PBS或不加PBS，缓冲甘油封片，荧光显微镜观察应呈阴性荧光（无与特异性荧光相似的荧光）。 （2）抑制试验：可分为二步法和一步法。 ①二步抑制法：标本先加未标记的特异性抗体，再加标记荧光抗体，结果应呈阴...
藻红蛋白 是从 红藻 中分离 纯化 地,目前普遍使用地新型 荧光标记 试剂 。在特定波长激发下,藻胆蛋白能发射强烈的荧光，其荧光强度是 荧光素 的30-100倍。具有很好的吸光性能和很高的量子产率，在 可见光谱 区有很宽的激发及发射范围。用常规的标记方法可以很方便地将其与生物素、 亲和素 和各种 单克隆抗体 结合起来制成 荧光探针 ，用于 免疫 检测、荧光显...
一、免疫荧光或免疫酶标技术在肾脏疾病中的应用的意义
用0.01%伊文氏蓝的0.01mol/l pH7.2PBS稀释荧光抗体，可将背景细胞和组织染色，呈红色荧光，与特异性黄绿色荧光形成鲜明的对比，减少了非特异性荧光，宜作常规应用。伊文氏蓝一般先配成1%溶液，保存于4℃，用前再稀释至0.01%用以和然释荧光抗体。 此外，还可以用胰酶消化组织切片或用10% 牛血 清蛋白封闭法等消除非特异性染色，提高特异性染色。
各种物镜均可应用，但最好用消色差的物镜，因其自体荧光极微且透光性能（波长范围）适合于荧光。由于图像在显微镜视野中的荧光亮度与物镜镜口率的平方成正比，而与其放大倍数成反比，所以为了提高荧光图像的亮度，应使用镜口率大的物镜。尤其在高倍放大时其影响非常明显。因此对荧光不够强的标本，应使用镜口率大的物镜，配合以尽可能低的目镜（4×,5×，6.3×等）。
在荧光显微镜中多用低倍目镜，如5×和6.3×。过去多用单筒目镜，因为其亮度比双筒目镜高一倍以上，但目前研究型荧光显微镜多用双筒目镜，观察很方便。
结膜囊细菌培养、免疫荧光素标记抗体或免疫酶标检查等，均可做出诊断。
专为荧光显微镜设计制作的聚光器是用石英 玻璃 或其他透紫外光的玻璃制成。分明视野聚光器的暗视野聚光器两种。还有相差荧光聚光器。 1．明视野聚光器 在一般荧光显微镜上多用明视野聚光器，它具有聚光力强，使用方便，特别适于低、中倍放大的标本观察。 2．暗视野聚光器 暗视野聚光器在荧光显微镜中的应用日益广泛。因为激发光不直接进入物镜，因而除散射光外，激发光也不进入目...
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