...)属嵌杯病毒科,无包膜,核酸为单股正链RNA。有两个基因型:缅甸株(B)和墨西哥株(M)。中国株与前者属同一亚型。病毒在体外不稳定,对高盐、氯化铯、氯仿等敏感。细胞培养尚未建立,多种非人灵长类动物可感染HEV。 (二)发病机制 HEV主要侵犯肝脏,通过直接致病作用和(或)免疫性损伤引起肝细胞炎症和坏死。肝脏病理改变有肝细胞变性,灶性坏死,汇管区淋巴细胞、单核...
...密度相同的密度区时就会停留在该区域。 离心分离密度大于1.3g/cm3的样品,如DNA、RNA,需要使用密度比蔗糖和甘油大的介质。重金属盐 氯化铯 (CsCl)是目前使用的最好的离心介质,它在离心场中可自行调节形成浓度梯度,并能保持稳定。在氯化铯形成的密度梯度中,离心管顶部的密度为:1.65g/ cm3,底部为:1.75g/ cm3。因为DNA的密度是1.7...
...长期,多系统的慢性进行性感染。本病毒可在兔肾,乳田 鼠肾 、绿猴肾、兔角膜等细胞培养中生长,能凝集鸡、鸽、鹅和人“o”型红细胞。病毒在体外的生活力弱,对紫外线、乙醚、氯化铯、去氧胆酸等均敏感。ph〈3.0可将其灭活。本病毒不耐热,56℃30分钟,37℃1.5小时均可将其杀死,4℃保存不稳定,最好保存在-60~-70℃可保持活力3个月,干燥冰冻下可保存9个月。
在获得特异的目的基因后,可用以下方法大量扩增制备:①用体外DNA重组技术与载体DNA相连,转化至大肠杆菌中进行无性繁殖。以氯化铯超速离心纯化重组质粒DNA,并以合适限制性内切酶消化,经凝胶电泳制备回收特异的目的核酸片段。②聚合酶链式反应(Poly-merase chain reaction, PCR)扩增技术:利用这种先进技术能简便快速制备大量特异性目的核酸...
...A被15N所标记,可以得到15N桪NA。然后将细菌转移到含有14N标记的NH4Cl培养基中进行培养,在培养不同代数时,收集细菌,裂介细胞,用氯化铯(CsCl)密度梯度离心法观察DNA所处的位置。由于15N桪NA的密度比普通DNA(14N-DNA)的密度大,在氯化铯密度梯度离心(density gradientcentrifugation)时,两种密度不同的D...
...有一个由150~300个腺苷酸残基组成的多腺苷(A)尾巴。本病毒不稳定,长期保存需放在液氮内。镁或锰离子有助于保持病毒颗粒的完整性。对高盐、氯化铯和氯仿敏感。在碱性环境中比较稳定。HEV的分类归属问题尚未最后肯定。最初曾归属于微小RNA病毒。后发现其在电镜下的形态和生物学特性与萼状病毒类似,因此又将HEV归入萼状病毒。但近来在分析HEV基因组核苷酸序列同源性...
...所标记,可以得到15N桪NA。然后将 细菌 转移到含有14N标记的NH4Cl培养基中进行培养,在培养不同代数时,收集细菌,裂介 细胞 ,用 氯化铯 (CsCl) 密度梯度离心 法观察DNA所处的位置。由于15N桪NA的密度比普通DNA(14N-DNA)的密度大,在氯化铯密度梯度离心(density gradientcentrifugation)时,两种密度不...
...有的。下面介绍几种基本上符合上述原则的梯度材料:①糖类:蔗糖、甘油、聚蔗糖(Ficoll)、 右旋糖酐 、 糖原 。②无机盐类:CsCl( 氯化铯 )、RbCl(氯化铷)、NaCl、KBr等。③有机碘化物:三碘苯甲酰 葡萄糖 胺(matrizamide)等。④硅 溶胶 :如Percoll。⑤ 蛋白质 :如 牛血清 白蛋白 。⑥重水。⑦非水溶性有机物:如氟代碳...
...料几乎是没有的。下面介绍几种基本上符合上述原则的梯度材料:①糖类:蔗糖、甘油、聚蔗糖(Ficoll)、右旋糖酐、糖原。②无机盐类:CsCl(氯化铯)、RbCl(氯化铷)、NaCl、KBr等。③有机碘化物:三碘苯甲酰 葡萄 糖胺(matrizamide)等。④硅溶胶:如Percoll。⑤蛋白质:如 牛血 清白蛋白。⑥重水。⑦非水溶性有机物:如氟代碳等。 ⒉梯度...
...在兔肾、乳田 鼠肾 、绿猴肾、兔角膜等细胞培养中生长,能凝集鸡、鸽、鹅和人“O”型红细胞。病毒在体外的生活力弱,对紫外线、乙醚、氯仿、甲醛、氯化铯、去氧胆酸钠等均敏感。pH<6.8和>8.1均不易生长,pH<3.0可将其灭活。本病毒不耐热,56℃ 30min、37℃ 1.5h均可将其杀死,4℃保存不稳定,在-60~-70℃可保持活力3个月,干燥冰冻下可保存9...
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