...这些DNA片段须是特异的,如细菌的毒力因子基因探针和人类Alu探针。这些DNA探针的获得有赖于分子克隆技术的发展和应用。以细菌为例,目前分子杂交技术用于细菌的分类和菌种鉴定比之G+C百分比值要准确的多,是细菌分类学的一个发展方向。加之分子杂交技术的高敏感性,分子杂交在临床微生物诊断上具有广阔的前景。细菌的基因组大小约5×106bp,约含3000个基因。各种细...
...位癌者则为对照组的8倍。近年来研究证明,患侵袭性宫颈癌和癌前期病变的妇女宫颈脱落细胞中,HSV-2抗原阳性率明显高于对照组,这种HSV-2抗原位于肿瘤细胞的胞质内,提示为肿瘤细胞表达的病毒抗原。有 人发 现,宫颈有高度非典型增生、原位癌及 鳞状细胞癌 者的活检组织中,用间接免疫荧光染色可发现其中的HSV-2抗原。应用DNA-RNA原位杂交技术在宫颈癌和癌前期...
不典型增生 原位癌常与浸润癌并存。
...WG病人中,血清IL-1、IL-2、IL-6和TNF-α水平升高,循环单核细胞TNF-α的产生增加。应用反转录聚合酶联反应(RT-PCR)、原位杂交和免疫组化技术发现病人肾小球IL-1和TNF-α的产生增加。最近Ludviksson通过研究活动期WG病人的外周血淋巴细胞,发现与正常人相比,患者CD4 T细胞产生的IFN-γ水平高10~20倍,TNF-α的产生...
...实质细胞内可见嗜酸的细胞核和嗜碱的胞浆包涵体。通过对福马林固定的石蜡切片的免疫组化染色定位CMV抗原对明确诊断有一定的帮助。对肝脏活检标体的原位杂交在特征性病理表现出现之前可以检测出CMV-DNA。所以,肝脏活检、CMV病毒培养和免疫组化对明确诊断是必要的。 为了预防CMV的感染,现在普遍采用大剂量的阿昔洛韦(acyclovir,成人:800mg,1次/6h...
...实质细胞内可见嗜酸的细胞核和嗜碱的胞浆包涵体。通过对福马林固定的石蜡切片的免疫组化染色定位CMV抗原对明确诊断有一定的帮助。对肝脏活检标体的原位杂交在特征性病理表现出现之前可以检测出CMV-DNA。所以,肝脏活检、CMV病毒培养和免疫组化对明确诊断是必要的。 为了预防CMV的感染,现在普遍采用大剂量的阿昔洛韦(acyclovir,成人:800mg,1次/6h...
...非目的重组体,但还只是粗筛,例如细菌可能发生 变异 而引起抗药性的改变,却并不代表目的序列的插入,所以需要做进一步细致的筛选。 二、 核酸 杂交法 利用标记的核酸做 探针 与转化细胞的DNA进行 分子杂交 ,可以直接筛选和鉴定目的序列克隆。常用的方法是将转化后生长的菌落复印到 硝酸纤维膜 上,用碱裂菌,菌落释放的DNA就吸附在膜上,再与标记的核酸探针 温育 ...
...心内膜心肌活检:病理检查对本病诊断无特异性,但有助于与特异性心肌病和急性心肌炎的鉴别诊断。用心内膜心肌活检标本进行多聚酶链式反应(PCR)或原位杂交,有助于感染病因诊断;或进行特异性细胞异常的基因分析。 近年来在临床上开展心内膜心肌活组织检查,由带活组织钳的心导管取得标本,进行病理与病毒检查,可以发现有否心肌炎症的证据,但目前对病理组织学的诊断标准和去除伪迹...
...隆抗体 技术,检测早期和晚期 蛋白 ,即可迅速确定诊断。 3. 核酸 测定 分子 生物学 技术为CMV性 视网膜炎 的诊断提供了很大帮助。 原位杂交 或PCR技术可以测定组织中的CMV 基因组 ,原位杂交是测定组织中CMV DNA 或 RNA 的一种敏感技术,对于活动性CMV性视网膜炎,此种技术既敏感又特异。但对于已接受治疗的患者,由于无病毒复制,此种技术的...
...方法简便易行,快速省时,不需昂贵的酶和dUTP等;只需光照,探针稳定,-20℃可保存12个月以上。适用于DNA和RNA,抗体和酶等的标记。在原位分子杂交,斑点杂交和Southern印迹杂交中应用,其特异性和灵敏性较高,价廉易购,国内已有试剂盒供应,军事医学科学院放射医学研究所马立人教授等研制和生产的光敏生物素核酸探针和检 测试 剂盒使用良好。 方法步骤:在一...
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